经皮穴位电刺激对大鼠合谷穴区局部皮肤肥大细胞和伤害性神经肽的影响
陈李圳,阚 宇,王奕力,张晓宁,王晓宇,何 伟,景向红
(中国中医科学院针灸研究所,北京 100700)
摘要:研究目的:经皮穴位电刺激疗法由于其操作简便、非刺入性、无痛等优点而逐渐应用于临床。临床证据表明经皮穴位电刺激可以替代针刺治疗某些疾病。以往的研究表明,手针可以激活穴位局部皮肤神经纤维释放神经肽并引起肥大细胞聚集和脱颗粒,释放五羟色胺和组织胺等。而经皮穴位电刺激的局部作用还不清楚。本研究的目的是研究经皮电刺激合谷穴的局部组织细胞化学反应。 研究方法: 经皮穴位电刺激大鼠左前肢合谷穴区,以同一大鼠对侧合谷为非刺激对照。采用免疫组织化学方法观察大鼠合谷穴区皮肤类胰蛋白酶标记的肥大细胞和降钙素基因相关肽(CGRP)或 P 物质(SP)标记的伤害性神经肽以及 5-羟色胺阳性细胞的分布。激光共聚焦显微观察 CGRP、 SP 和肥大细胞的共表达分布,以及 5-羟色胺(5-HT)标记的肥大细胞与 SP 共表达分布。最后用甲苯胺蓝染色观察肥大细胞的形态学变化并进行细胞计数。研究结果:SP-IR 或 CGRP-IR 阳性纤维分布在表皮和真皮内,其中大部分集中在局部真皮。经皮穴位电刺激后穴区 SP 和 CGRP 免疫反应阳性神经纤维(SP-IR 或 CGRP-IR)表达较对照穴位明显增加。在对照组观察到较为完整的类胰蛋白酶标记的肥大细胞少量分布于真皮层,而经皮穴位电刺激后肥大细胞变形并聚集于组织或分布于 SP-IR 或 CGRP-IR 神经纤维周围。此外,部分肥大细胞聚集在血管附近,伴随有 5-HT 颗粒物脱出。而且肥大细胞总数和脱颗粒率显著增加。结论:以上结果提示经皮穴位电刺激后出现合谷穴区“类针灸样”的局部作用,即 SP-IR 和 CGRP-IR 神经纤维局部高表达,肥大细胞聚集在神经纤维和血管周围,并脱颗粒释放 5-HT。
关键词:针灸学;合谷穴;经皮穴位电刺激;降钙素基因相关肽;P 物质;肥大细胞;五羟色胺